牛源多杀性巴氏杆菌新型交叉保护性抗原的筛选

摘要：

为了筛选多杀性巴氏杆菌潜在的交叉保护性抗原,首先对牛源多杀性巴氏杆菌PmCQ2株(A型)、PmCQ6株(A型)、PmB株(B型)、PmF株(F型)全基因组序列进行分泌蛋白及膜蛋白预测,并使用Signal、TMMHM在线分析筛选到48个候选共有抗原基因;然后分别克隆于pET-28α中构建原核重组表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达,SDS-PAGE检测获得31个重组表达蛋白.间接ELISA检测重组蛋白对3种不同血清型牛多杀性巴氏杆菌多抗的反应原性,发现13个重组蛋白具有较强的反应原性.最后选择5个重组蛋白免疫小鼠后,分别采用10 LD50 PmCQ2、PmB和PmF进行攻毒保护性试验,结果显示:r-PmCQ2_1g0376免疫后的小鼠对PmCQ2和PmB的攻毒保护率为50％和30％,对PmF则没有保护性;r-PmCQ2_4g0132免疫后对PmCQ2、PmB和PmF株的攻毒保护率分别为80％,20％和10％;r-PmCQ2_1g0311免疫后的小鼠对PmCQ2的攻毒保护率为30％,对PmB和PmF株均无保护性.本试验筛选出2个交叉保护性抗原,可以不同程度保护同源或异源菌株的攻击,为多杀性巴氏杆菌新型疫苗候选蛋白的筛选奠定了基础.

关键词：牛源多杀性巴氏杆菌、生物信息学、交叉保护抗原、筛选

所属期刊栏目：36

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家现代农业肉牛牦牛产业技术体系建设专项基金资助项目CARS-38

在线出版日期：2016-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1293-1300