鸡囊胚细胞冷冻损伤的评价方法

摘要：

采用滤纸环法分离鸡囊胚细胞(blastodermal cells,BCs),冷冻复苏后使用二乙酰荧光素(fluorescein diacetate,FDA)测定细胞活率,以及培养24 h测定细胞贴壁率简称“贴壁率法”,探究2种方法在不同冷冻程序优化试验中对细胞冷冻损伤的评价效果.结果显示,FDA染色法与贴壁率法在冷冻保护剂浓度优化、冷冻及解冻速率优化试验中对细胞冷冻损伤的评价结果差异不显著(P＞0.05),相关性很好,但也有一定差异;不同冷冻剂浓度优化试验中,5％DMSO冷冻保护液有细胞活率,但无贴壁现象;投入液氮温度对比试验中,-35℃以后,随着投入温度的降低,细胞活率略微升高.但贴壁率呈较明显的下降趋势.因此.2种方法均适合鸡BCs冷冻损伤评价,但贴壁率法能给出更多关于细胞状况的信息,评价结果更加真实可靠.

关键词：鸡、囊胚细胞、冷冻损伤、FDA荧光染色、细胞贴壁率

所属期刊栏目：36

分类号：S814.8(普通畜牧学)

资助基金：国家国际科技合作专项资助项目2013DFG31810;湖南省科技计划资助项目2014WK2008;长沙市科技计划资助项目K1307134-24;湖南省研究生科研创新资助项目CX2015B279

在线出版日期：2016-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1065-1070