非酯化脂肪酸对原代培养犊牛肝细胞胰岛素信号通路的影响

摘要：

旨在探讨非酯化脂肪酸(nonestesterified fatty acids,NEFAs)对体外原代培养犊牛肝细胞胰岛素信号通路的影响及SIRT1在其中的调控作用.选择培养48 h的原代犊牛肝细胞,添加不同浓度的NEFAs(0、0.6、1.2、1.8 mmol/L),继续培养12h,胰岛素处理组在收样前用100 nmol/L胰岛素处理30 min,每个浓度3个重复.另外选取已培养48h的细胞,用SIRT1抑制剂Nicotinamide (10 mmol/L)处理12h,胰岛素处理组在收样前用100 mmol/L胰岛素处理30 min.运用免疫印迹Western blot方法,检测NEFAs和Nicotinamide对肝细胞胰岛素信号通路关键蛋白IR和Akt的磷酸化水平及SIRT1蛋白表达水平的影响.结果显示,与对照组相比,1.2、1.8 mmol/L NEFAs组胰岛素刺激的IR磷酸化水平显著降低(P＜0.01),而Akt的磷酸化程度在NEFAs浓度为0.6 mmol/L时即显著降低(P＜0.01),同时,SIRT1的蛋白表达水平在NEFAs为1.2、1.8 mmol/L显著降低(P＜0.0l);添加SIRT1抑制荆显著降低SIRT1的蛋白表达水平(P＜0.01),同时胰岛素刺激的Akt磷酸化水平也显著降低(P＜0.01).结果表明,高浓度的NEFAs可以损伤体外原代培养肝细胞的胰岛素信号通路,SIRT1在NEFAs损伤的胰岛素信号通路中发挥重要作用.

关键词：NEFAs、SIRT1、胰岛素信号通路、肝细胞、犊牛

所属期刊栏目：36

分类号：S856.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31372494,31402265,31472247,31460681

在线出版日期：2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：508-512