E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养的影响因素

摘要：

研究E.tenella子孢子的纯化方法、接种剂量以及细胞生长状态对E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中的影响,为E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养模型的建立提供依据.以子孢子回收率和细胞感染率为指标,对DE52纤维素层析法、蔗糖密度梯度离心法和双层目筛过滤法纯化子孢子的效果进行比较;测定了子孢子接种剂量和细胞生长状态对虫体感染率的影响,并对各发育阶段的虫体进行观察.结果表明,采用双层目筛过滤法可得到纯净的子孢子,并且回收率和接种细胞后24.48 h的虫体感染率均显著(P＜0.05)和极显著(P＜0.01)高于DE52纤维素层析法和蔗糖密度梯度离心法;在48孔细胞培养板中,子孢子的最佳感染剂量为每孔10万个;鸡胚盲肠上皮细胞覆盖率为85％～90％且贴壁细胞融合率在30％以上时接种子孢子,各时间段虫体的入侵率较高,且可以观察到E.tenella主要发育阶段的虫体.本研究获得了能使E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞完成整个内生发育的子孢子纯化方法、接种剂量和细胞生长状态.

关键词：E.tenella、鸡胚、盲肠上皮细胞、体外培养、影响因素

所属期刊栏目：36

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30771619;31272536

在线出版日期：2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：454-458