柔嫩艾美耳球虫Cytbc1基因的克隆、序列分析及重组表达

摘要：

为研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)细胞色素bc 1复合物(cytochrome bcl,Cytbcl)的生化特性,本研究对其基因进行了克隆和原核表达.根据EupathDB已公布的E.tenella Houghton株Cytbc1基因序列(Contig ID:ETH 00007855)设计特异性引物,运用RT PCR方法扩增EtCytbcl基因序列,并将其克隆到表达载体pCold43a中,构建重组质粒pCold43a-EtCytbc1,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞E.coli Rosetta(DE3),并进行IPTG诱导表达.结果表明,EtCytbc1的ORF序列(687 bp),编码228个氨基酸;重组菌pCold43a-EtCytbc1能成功诱导表达.pCold43a表达部分可溶性蛋白,表达产物纯化后可用于酶生化特性分析.柔嫩艾美耳球虫Cytbc1基因的成功克隆表达为该酶的功能研究奠定了基础.

关键词：柔嫩艾美耳球虫、细胞色素bcl复合物、克隆、原核表达

所属期刊栏目：36

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31201902;31302087;珠江科技新星资助项目2012J2200059;广东省自然科学基金资助项目S2013040015220;广东省农业科学院院长基金资助项目201113

在线出版日期：2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：448-453