猪IgG Fc受体与恒定链的细胞定位及相互关系研究

摘要：

克隆猪IgG Fc受体基因(FcRn)及其剪接体基因,研究其与猪恒定链(Ii)的细胞定位及相互关系.利用Triozl法从猪十二指肠组织提取总RNA,进行RT-PCR扩增,PCR产物与pMD-18T载体连接,筛选阳性克隆并序列测定和分析.进一步构建了融合表达绿色荧光蛋白的FcRn基因及其剪接体真核表达载体,利用脂质俸Lipofectamine 2000介导法与能表达红色荧光的Ii真核表达载体共转染COS-7细胞,共聚焦荧光显微镜检测FcRn基因与猪Ii链在细胞中的共定位,并通过免疫共沉淀进一步研究它们之间的相互关系.序列分析结果表明,FcRn基因序列大小为1 071 bp,剪接体片段大小为795 bp,两者氨基酸序列均含有胞外结构域、跨膜区和胞浆尾区.细胞定位研究显示,LFC-GFP或SFC-GFP与RFP-Ii共转染COS-7细胞后共定位在细胞的内膜系统.免疫共沉淀结果显示,GFP-Ii与LFC-GFP或SFC-GFP共转染后,检测到LFC-GFP或SFC-GFP的表达.猪Ii链与FcRn基因或剪接体能够形成复合体,共定位于细胞的内膜系统.

关键词：猪、FcRn、剪接体、序列分析、细胞共定位

所属期刊栏目：36

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：安徽省高校自然科学研究重点资助项目KJ2015A078;国家自然科学基金资助项目30671537

在线出版日期：2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：401-406,453