猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

参照GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因以及猪圆环病毒2型(PCV2)中ORF2特异性序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PRV野毒株和猪圆环病毒(PCV2)的双重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性.结果表明,该方法检测PRV和PCV2灵敏度分别可达2.23×101 、4.5×102拷贝L,均比常规PCR检测方法高100倍;同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、均为阴性,无交叉反应;对30份疑似病料进行检测并与普通PCR进行比较,结果显示,二者检测PRV的总符合率为96.67％,检测PCV2的总符合率为93.33％.本试验建立的TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法可同时对PRV野毒株和PCV2进行早期快速诊断,可应用于病原学监测,流行病学调查等.

关键词：猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒TaqMan-MGB、双重荧光定量PCR

所属期刊栏目：36

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：福建省农业科学院青年科技人才创新基金资助项目2010QC-13;省农业科学院重大专项资助项目ZDZX-1302

在线出版日期：2016-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：378-383