比格犬ERβ1293稳定细胞系的建立

摘要：

为了建立ERβ1293的稳定表达细胞系,为ERβ1293的功能研究奠定基础.以重组质粒pEGFG-N1-ERβ1 293为模板,扩增出全长ERβ1293,经胶回收纯化后连接到pMD18-T Vector,经测序鉴定后双酶切连接至Lenti-OE-Flag载体,重组质粒经PCR、双酶切、测序鉴定;使用HEK-293T包装细胞系,包装产生慢病毒.将所得病毒悬液感染HEK293细胞,利用Puromycin加以筛选,获得稳定表达细胞系,并采用Western blot方法验证基因表达情况.结果获得了Lenti-OE-Flag-ERβ1293重组质粒,并成功包装成慢病毒.利用病毒感染HEK293细胞后获得了稳定表达细胞系,Westernblot方法证实,稳定表达细胞系可以成功表达ERβ1293蛋白,为研究ERβ1293的功能奠定了基础.

关键词：ERβ1293、慢病毒、Western blot

所属期刊栏目：36

分类号：S829.6(家畜)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31712271

在线出版日期：2016-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：249-251