产毒多杀性巴氏杆菌毒素不同重组片段的免疫原性比较

摘要：

为了研究多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)片段的免疫原性,本试验对8个PMT片段分别进行了原核表达后比较分析.根据toxA基因序列,分别设计引物扩增出8个分段基因,再将其克隆到原核表达载体pET32a系统中.SDS-PAGE结果表明,在大肠杆菌BL21(DE3)中均成功表达;Western-blotting结果表明,仅重组PMT1506aa、PMT1-391aa、PMT505-1285aa和PMT9731285aa片段的表达产物具有反应原性.将该4个重组PMT片段分别制成疫苗,皮下注射免疫小鼠,间隔14 d进行二免.二免后14d,用天然PMT进行皮下注射攻毒.结果以2×LD100进行攻毒时,免疫保护效果PMT1-506aa(10/10)、PMT505-1285aa(10/10)、PMT9731285aa(8/10)显著优于PMT1-391aa(1/10);以5×LD100进行攻毒时,免疫保护效果PMT1-506aa(10/10)、PMT505-1285aa (10/10)显著优于PMT973-1285aa(3/10)、PMT1391aa(0/10);以10×LD100进行攻毒时,免疫保护效果PMT505-1285aa(10/10)显著优于PMT1-506aa(3/10).本研究表明,PMT505-1285aa的免疫保护率最高,最适合作为预防PAR的候选疫苗材料.

关键词：产毒多杀性巴氏杆菌、PMT、分段、免疫原性

所属期刊栏目：36

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2016-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：221-227