猪传染性胸膜肺炎放线杆菌LAMP方法的建立

摘要：

为建立快速检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的鉴别方法,本研究根据APP ApxIVA基因的保守区设计6条环介导等温扩增(LAMP)引物,利用Loopamp Realtime Turbidimeter LA-320c实时浊度仪对反应体系和条件进行优化,建立了APP的LAMP方法.结果显示:该方法在64℃下反应15 min DNA即可出现扩增,扩增后2～3 min内即可判定结果.最低检测限为0.307 ng/L,具有良好的重复性及稳定性,与其他病原菌无交叉反应,同时,试验结果可实现肉眼可视化观察.采用建立的LAMP方法与SN/T 1447-2011标准公布的方法同时对36份临床疑似APP样品进行检测分析,结果显示:APP阳性10份,阴性26份,两种方法的符合率为100％.本研究建立的方法为防止猪传染性胸膜肺炎的传播提供了有效的检测手段.

关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、环介导等温扩增技术(LAMP)、ApxIVA基因

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分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：质检公益性资助项目201310093;国家质检总局科技资助项目2014IK247;2013IK049

在线出版日期：2016-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：200-205