10.16303/j.cnki.1005-4545.2016.01.16
实时荧光定量PCR法检测转基因猪外源基因整合拷贝数
以GFP转基因猪为研究对象,以转铁蛋白受体基因为内参基因,通过SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR建立针对外源基因GFP和内参基因的双标准曲线和方程.对转基因猪基因组DNA中外源基因和内参基因的拷贝教同时定量检测,外源基因与内参基因起始模板拷贝数的比值即为外源基因在转基因猪中的整合拷贝数.同时,利用Southern-blot进行验证分析.结果显示:实时荧光定量PCR法检测2头转基因阳性猪外源基因拷贝数分别为3和2,2头转基因阴性猪外源基因拷贝数均为0,结果同Southern-blot检测一致.结果表明:实时荧光定量PCR法高通量、灵敏、方便,可以更好的用于转基因猪外源基因整合拷贝数的检测.
荧光定量PCR、转基因猪、拷贝数
36
Q78;S813(基因工程(遗传工程))
国家转基因重大专项2013ZX08006-002,2011ZX08006-002;山东省现代农业生猪产业技术体系建设专项SDAIT-06-022-03;山东省农业良种工程重大课题2013LZ02-015
2016-02-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
90-94,107