牛源犬新孢子虫NcAMA1基因酵母双杂交诱饵载体构建及鉴定

摘要：

为筛选牛源犬新孢子虫AMA1与虫体互作的靶蛋白,构建NcAMA1基因酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-AMA1.本试验应用RT-PCR技术从虫体总RNA中扩增了去除跨膜螺旋的AMA1基因,定向克隆到酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组诱饵载体转化酵母Y2H,并验证其在酵母细胞中毒性作用和有无自激活现象.结果显示:本试验成功构建了诱饵载体pGBKT7-AMA1,并证明其对酵母细胞无毒性,且对报告基因无自激活.结果表明:诱饵载体pGBKT7-AMA1可用于酵母双杂交系统筛选与虫体互作的宿主蛋白.

关键词：犬新孢子虫、AMA1、酵母双杂交、诱饵载体

所属期刊栏目：36

分类号：S852.72(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31160501,31360605;吉林省重点科技攻关资助项目20140204078NY

在线出版日期：2016-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：66-69