鮰爱德华菌外膜蛋白ompN2基因的克隆表达、分子特性与免疫原性分析

摘要：

利用特异性引物扩增了分离自斑点叉尾鲴的鮰爱德华菌外膜蛋白ompN2基因并进行分子克隆,应用生物信息学工具对ompN2基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分子特性分析,并进行了目的蛋白的原核表达和免疫原性检测.结果显示:ompN2基因全长1 122 bp(GenBank登录号为KP159419),包含1个完整的开放阅读框,编码373个氨基酸,其序列具有极高的保守性,与鮰爱德华菌外膜穿孔蛋白ompC同源性最高,序列一致性为100％,进化树聚为一支;具有1个革兰阴性菌穿孔蛋白(Gram-neg-porins)保守结构域,存在1个信号肽,不含跨膜区,是一种膜外蛋白;具有与蛋白翻译后修饰功能相关的磷酸化位点20个和N-糖基化位点4个;具有9个与免疫相关的抗原决定簇区域,表明可以作为潜在的候选疫苗.此外,SDS-PAGE检测发现,该蛋白主要以包涵体形式表达在沉淀中,Western-bolt结果显示重组蛋白表达成功,且具有较好的免疫原性.以上结果为筛选ompN2作为斑点叉尾鮰抵抗鮰爱德华氏菌感染的疫苗候选基因并进行相应蛋白的表达提供了理论依据,同时为研究ompN2蛋白的生物学功能,了解ompN2基因结构与功能的关系奠定了基础.

关键词：鮰爱德华菌、ompN2基因、克隆表达、生物信息学、免疫原性

所属期刊栏目：36

分类号：S941.42(水产保护学)

资助基金：教育部《长江学者和创新团队发展计划》创新团队项目IRT0848;四川省科技支撑计划项目2014NZ0003

在线出版日期：2016-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：56-65,69