10.16303/j.cnki.1005-4545.2015.09.08
羊传染性脓疱病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立
根据GenBank已经发表的CEV参考毒株(登录号:AF097215)F1L基因序列,利用Primer Express 3.0软件设计合成1对特异性引物,以pMD19-T-63 bp重组阳性质粒作为标准品,建立了羊传染性脓疱病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法.经过反应条件的优化,建立的羊传染性脓疱病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的线性关系良好,标准曲线的相关系数R2 =0.99,扩增效率E=1.18.该方法敏感性高且特异性强,最低检出下限为65.47拷贝/μL,与羊痘和口蹄疫病毒均不发生交叉反应,重复性好,组内和组间变异系数分别为0.17%~0.59%和0.74%~1.25%.运用该方法对2例羊传染性脓疱病例进行检测,结果均为阳性.因此,可将该方法应用于临床诊断,具有准确、高效、快捷、灵敏的特点.
羊传染性脓疱病毒、SYBR GreenⅠ、实时荧光定量PCR
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S852.65(动物医学(兽医学))
2015-12-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1441-1445