牛UK株轮状病毒VP8*蛋白多拷贝嵌合表位的免疫原性分析

摘要：

轮状病毒VP8*蛋白由纤突蛋白VP4裂解形成,VP8*蛋白决定了VP4蛋白血清特异性中和反应相关,本试验原核表达UK株牛轮状病毒VP8*多拷贝嵌合肽段,纯化并比较分析其免疫原性.首先根据GenBank上发表的牛轮状病毒UK株VP8*蛋白的编码序列及可能的主要抗原表位区(aa 1～11和aa 218～235),设计并合成引物,以扩增这两个区段的嵌合基因,克隆到原核表达载体pET-28α(+)上,并通过酶切位点连接构建嵌合基因的3拷贝重复重组表达载体,同时构建单拷贝和全长VP8*表达载体.重组载体转化到E.coli感受态细胞中,IPTG诱导表达后,重组蛋白经SDS-PAGE和Western blot证实重组蛋白大小与预期相符且能与His-tag单抗发生特异性反应;ELISA结果表明免疫后3拷贝蛋白较单拷贝蛋白血清抗体水平更高.本试验确定了原核表达的3拷贝嵌合VP8*重组蛋白免疫后具有良好的抗原性,为今后抗轮状病毒疫苗的研制及抗轮状病毒药物的发展提供参考.

关键词：轮状病毒、VP8*蛋白、表位疫苗、原核表达、免疫原性

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分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学青年基金资助项目31201909;黑龙江博士后科研启动资助项目LBH-Q13134;黑龙江省自然科学青年基金资助项目QC2013C028

在线出版日期：2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1429-1434