MDV Meq-clustered miRNAs基因缺失BAC克隆株的构建及其体外增殖特性

摘要：

为构建缺失马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV) Meq基因簇microRNAs(Meq-clustered miRNAs的突变株,本研究在vv MDV GX0101细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)克隆的基础上,采用Red/ET同源重组技术将Meq-clustered miRNAs的编码基因进行缺失突变,经PCR鉴定及序列分析证明Meq-clustermiRNAs序列成功缺失后,提取△meq-miRNAs BAC DNA,转染鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒拯救,用SYBRGreenⅠ qRT-PCR检测病毒体外增殖特性.结果表明成功拯救出缺失MDV Meq-clustered miRNAs基因的感染性BAC克隆株GX0101△meq-miRNAs,且该缺失株与亲本株GX0101 BAC具有相似的增殖曲线,Meq-clustered miR-NAs是MDV体外复制的非必需基因.MDV Meq-clustered miRNAs基因缺失感染性BAC克隆株的成功构建为进一步研究MDV Meq-clustered miRNAs在MDV致病扣致肿瘤方面的作用奠定了基础.

关键词：马立克氏病病毒、细菌人工染色体、Red/ET、克隆

所属期刊栏目：35

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31072145,31372445

在线出版日期：2015-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：851-857