猪圆环病毒2型标记毒株的构建与iDNA疫苗的初步研究
为实现携带分子标记的猪圆环病毒2型标记毒株的构建,对其进行感染性DNA(iDNA)疫苗的初步研究,即构建的感染性克隆质粒既能发挥DNA疫苗的作用,同时又能在动物机体内拯救出活病毒,发挥病毒活疫苗的作用,本研究以PCV2 Cap蛋白末端具有赖氨酸延伸特征的GZ-RH1株为材料,构建该毒株的感染性克隆质粒pcD-NA3.1(+)-PCV2,并在病毒基因组中引入1个SalⅠ酶切位点作为鉴别拯救病毒的分子标记.将该感染性克隆质粒转染PK-15传代细胞进行病毒拯救后,通过IPMA、PCR-RFLP以及全基因组测序等试验对拯救病毒进行检测和鉴定,并初步测定了拯救病毒在体外细胞培养的增殖能力.结果表明,利用构建的感染性克隆质粒拯救获得的PCV2标记毒株,经盲传10代后毒价可到105.3 TCID50/mL,分子标记能够稳定存在,该感染性克隆质粒可以应用到PCV2 iDNA疫苗的初步研究中.昆明小鼠接毒试验结果表明,构建的感染性克隆质粒在小鼠体内也具有感染性,能够拯救出PCV2标记毒株,且可以诱导产生抗PCV2的抗体,与体外拯救的标记毒株免疫小鼠具有类似的体内生物学特性,表明PCV2 iDNA新型疫苗构建策略是可行的.本研究为进一步研究PCV2 iDNA疫苗奠定了基础.
猪圆环病毒2型、分子标记、感染性克隆、病毒拯救、iDNA疫苗
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S852.65(动物医学（兽医学）)
“携带遗传标记的猪圆环病毒反向遗传操作平台的构建”计划资助项目黔科合LH字20147670;贵州省农业科技攻关计划资助项目黔科NY20103042
2015-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
698-703
