猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白7特异性抗体体外抑制病毒复制
为进一步探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白7(Nsp7)在病毒复制过程中发挥的生物学作用,本研究在获得Nsp7可溶性重组蛋白的基础上,首先制备了抗Nsp7蛋白兔源多克隆抗体.确定抗体的免疫活性后,将其与PRRSV共同接种Marc-145细胞.孵育1h后弃掉混合物,加细胞维持液继续培养48 h,应用TaqMan探针Real Time PCR方法对培养物中病毒拷贝数进行检查.结果显示,本研究制备的多克隆抗体可以和大肠杆菌表达的Nsp7α、Nsp7β重组蛋白发生特异性结合,并有效用于病毒感染Marc-145细胞后其Nsp7蛋白分布情况的原位检测;更为重要的是,与正常家兔血清相比,不同稀释倍数的抗Nsp7多克隆抗体均可对病毒的复制产生抑制作用,其中10-3倍稀释血清的抑制率可达88.4%.结果表明,Nsp7特异性抗体可有效用于PRRSV抑制试验的研究;Nsp7作为PRRSV复制酶多聚蛋白成员之一,在病毒复制过程中发挥着重要作用.
猪繁殖与呼吸综合征病毒、非结构蛋白7、病毒抑制
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S852.65(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金资助项目31201876、31272564;广东省农业攻关计划资助项目2012B020306004
2015-07-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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