问号钩端螺旋体LigA基因的原核表达及其产物免疫保护性研究

摘要：

构建问号钩端螺旋体LigA基因保守区和可变区的重组原核表达质粒,了解重组表达的LigAcon蛋白和LigAvar蛋白对金黄地鼠的免疫保护作用.采用高保真PCR扩增LigAcon和LigAvar基因并测序,构建LigAcon和LigAvar基因原核表达系统.SDS-PAGE和Western-blotting鉴定蛋白表达及其纯化情况.测定金黄地鼠的存活率来观察免疫LigAcon和LigAvar蛋白的金黄地鼠对感染问号钩端螺旋体56606株后的保护率.测序结果显示所得片段分别为LigAcon和LigAvar的编码序列,酶切及PCR分析证实重组质粒构建成功,SDS-PAGE和Westernblotting分析重组质粒可高效表达蛋白LigAcon和LigAvar.LigAcon免疫组,LigAvar免疫组,及LigAcon+ LigAvar免疫组对金黄地鼠的免疫保护率均为100％.LigA蛋白是问号钩端螺旋体属特异性保护性抗原,未来可能在钩端螺旋体病的诊断和预防中发挥作用.

关键词：问号钩端螺旋体、LigAcon、LigAvar、原核表达、免疫保护

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分类号：S852.63(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业科研专项经费资助项目201303042;国家自然科学基金资助项目31201925

在线出版日期：2015-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：413-417,424