猪核转录因子C-Rel亚基的克隆及PRV体外感染PK-15细胞对C-Rel转录时相的影响

摘要：

核转录因子κB是普遍存在于真核细胞中的转录调节因子,其信号通路在细菌、病毒感染宿主致病过程中起关键作用,直接调控宿主先天性免疫反应及细胞增殖、分化和凋亡,它的异常活化可能是PRV感染导致免疫抑制的重要原因.为进一步了解NF-κB C-Rel亚基序列特征及PRV对C-Rel mRNA转录时相的影响,本试验采用RT PCR从猪外周血淋巴细胞中扩增NF-κB C-Rel ORF,获得阳性质粒后测序,进行相关生物信息学分析;运用实时荧光定量PCR技术对PRV感染PK-15细胞后不同时期C-Rel mRNA的转录水平进行定量分析.序列分析结果表明:所扩增猪C-Rel亚基ORF长1 773 bp,编码590 aa;猪C-Rel核苷酸序列与不同动物的C-Rel核苷酸序列相似性较高;大部分位于细胞核内(76.0％),无信号肽及跨膜区.荧光定量结果表明:与对照组相比,感染后0～4 h,C Rel转录水平下调,2和4h差异显著(P＜0.05);4～12 h,快速上调,12h达到转录高峰(P＜0.01);12 h后逐渐下降,24～120 h,维持在较低水平,其中36 h差异极显著(P＜0.01),48、72和120 h差异显著(P＜0.05).本研究推断PRV感染早期较弱的先天性免疫应答可能与C Rel活化水平低下有关.

关键词：核转录因子-κappaB、C-Rel、序列分析、转录时相

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分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省科技支撑计划资助项目2010NZ0112;四川省科技支撑计划资助项目2011FZ0065;四川省科技支撑计划—生猪现代产业链关键技术研究集成与产业化示范资助项目2012NZ0001

在线出版日期：2015-02-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1877-1882