CTCF因子结合位点突变和缺失质粒的构建及其调控效应分析

摘要：

本研究采用SOE-PCR技术,分别获得了CTCF因子结合序列的突变和缺失的序列,构建2个重组质粒pEG-FP-N1/1554M和pEGFP N1/1549.质粒pEGFP-N1/1554M由CTCF因子的结合序列CCCTC突变为TAAGT后的序列替换pEGFP-N1的CMV启动子构建而成;质粒pEGFP-N1/1549由CTCF因子结合序列CCCTC缺失后序列(长1 549 bp)替换pEGFP-N1的CMV启动子构建而成.用重组质粒分别转染牛乳腺上皮细胞(BMEC),经筛选获得稳定的单克隆细胞,测定荧光强度并与对照组pEGFP-N1/1554(未缺失)比较荧光强度.结果表明,质粒pEG-FP-N1/1554M的启动子活性显著强于对照组(P＜0.01),质粒pEGFP-N1/1549的启动子活性显著强于对照组(P＜0.01);即CTCF因子结合位点突变和缺失后,bLTF基因启动子活性都显著增强.

关键词：CTCF、质粒、构建、调控

所属期刊栏目：34

分类号：S852.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技支撑计划重点资助项目3D510S086604

在线出版日期：2014-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1634-1637,1646