奶牛乳房炎无乳链球菌的分离及PCR鉴定

摘要：

利用THB(Todd-Hewitt Broth)固体培养基和色素试验培养基选择培养无乳链球菌,参照GenBank中无乳链球菌参考菌株(Accession:AF015927.1、JQ289582.1) 16S rRNA和种属特异性基因cfb(CAMP因子)序列设计引物,对奶样中分离的12株疑似无乳链球菌进行鉴定.结果显示,经PCR扩增后,被检测的12株细菌均可扩增出预期大小的16S rRNA基因序列,而12株中有8株可以扩增出预期大小的cfb基因序列,条带单一,特异性好.序列BLAST显示,12株菌的16S rRNA基因序列与NCBI上报道的无乳链球菌相应序列高度同源(＞99.0％),各分离菌株间的16S rRNA基因序列也高度同源(99.0％～100.0％);cfb基因序列与NCBI上已报道的无乳链球菌相应序列具有高度同源性(＞99.0％),各菌株间cfb基因序列也高度同源(100.0％).经选择培养与PCR鉴定结果可以确定12株疑似菌株中有8株为无乳链球菌.

关键词：奶牛乳房炎、无乳链球菌、PCR鉴定、16S rRNA、cfb基因

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分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：“十二五”农村领域国家科技计划资助项目2011AA10A210;兰州市科技局科技三项资助项目033143

在线出版日期：2014-11-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1261-1266