肉鸡硫氧还蛋白原核表达载体的构建、蛋白纯化及其活性鉴定

摘要：

根据GenBank中肉鸡硫氧还蛋白(Trx)基因的cDNA序列及载体pET28a(+)中的多克隆位点设计引物,进行Trx克隆和原核表达载体的构建,并在大肠杆菌中表达.应用镍柱亲和层析对该融合蛋白进行纯化;采用胰岛索还原法对重组Trx进行活性鉴定.结果显示:成功构建了pET28a-Trx重组质粒,纯化的目的蛋白纯度可达到90％,质量浓度为4 g/L.纯化的重组Trx(GgTrx)具有较高的还原胰岛素二硫键能力,并且呈现出浓度依赖效应.本研究为Trx蛋白应用于治疗氧化应激性疾病奠定了基础.

关键词：硫氧还蛋白、肉鸡、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：34

分类号：S852.2(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2014-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：942-945