猪传染性胃肠炎病毒样颗粒在杆状病毒表达系统中的体外组装

摘要：

利用RT-PCR方法扩增TGEV M、sM和N结构蛋白基因,分别将M、sM和N基因克隆入杆状病毒供体质粒pFastBacTM Dual,获得转移质粒pFastBacTMDual-M、pFastBacTMDual-sM和pFastBacTM Dual-N,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,经抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-M、Bacmid-sM和Bacmid-N,在Cellfection作用下,将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rBac-M、rBac-sM和rBac-N.通过间接免疫荧光试验检测显示,重组蛋白在杆状病毒感染的sf9细胞中获得正确表达.将重组杆状病毒按照以下感染组合进行TGEV VLPs组装的研究:rBac-M、rBac-sM、rBac-N单独感染sf9细胞,rBac-M+ rBac-N、rBac-M+ rBac-sM联合感染sf9细胞.结果表明,rBac-M、rBac-M+ rBac-sM、rBac-M+ rBac-N感染的昆虫细胞可见类病毒样粒子,rBac-sM、rBac-N单独感染sf9细胞未见形成明显的病毒样颗粒.试验结果为进一步研究TGEV结构蛋白在病毒装配过程中的作用提供了理论依据.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、杆状病毒表达系统、病毒样颗粒

所属期刊栏目：34

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2014-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：841-847