猪痘病毒P35基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

摘要：

为建立猪痘病毒(SWPV)血清学检测方法,根据SWPV的P35基因设计1对引物,从SWPV江西分离株(JX01)的细胞培养物中扩增到975 bp的P35基因.将P35基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,将其进行原核表达,经SDS-PAGE分析,表达P35重组蛋白约64 000.采用MagneGST蛋白纯化试剂盒纯化P35重组蛋白,以纯化的重组蛋白为检测抗原,建立了SWPV抗体间接ELISA检测方法,间接ELISA条件为:P35重组蛋白包被质量浓度为10 mg/L,被检猪血清的稀释倍数为1∶80.以建立的间接ELISA方法对江西省47个猪场的471份猪血清进行了SWPV抗体的检测,结果猪血清抗体阳性率为35.7％,表明江西省部分猪场存在较普遍的SWPV感染.

关键词：猪痘病毒、P35基因、原核表达,间接ELISA

所属期刊栏目：33

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31160498

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1488-1492