猪链球菌2型重组suilysin的高效表达及其生物学特性

摘要：

根据猪链球菌2型(SS2)HA9801株溶血素(suilysin,SLY)基因全长序列设计引物,扩增SLY基因,与原核表达载体pET-28a连接,转入大肠杆菌Transetta (DE3)中诱导表达,收集表达菌体,超声破壁、镍柱纯化获得可溶性rSLY蛋白,电泳鉴定后测定rSLY的溶血活性及其溶血谱,系统研究温度、酸碱度、离子强度等理化因素对rSLY溶血活性的影响.结果表明,本试验建立的rSLY原核表达体系能高效可溶性表达具有溶血活性的rSLY,纯度达电泳纯,相对分子质量为54 000左右,100 mL菌液诱导后能纯化出约8 mg电泳纯的rSLY.rSLY具有高溶血活性,溶血比活为4 057 HU/mg.rSLY对多种动物的红细胞有溶血作用,其中对猪、兔和豚鼠的作用最强.rSLY在4℃保存时溶血活性最稳定,保存48h后溶血活性不降低.在pH 6～7和离子强度为500 mmol/L时溶血活性最高.本试验获得了高表达、可溶性、高溶血活性的rSLY,首次系统研究了不同理化因素对rSLY生物学活性的影响,为SLY致病机理深入研究及SS2亚单位疫苗和诊断试剂的研制奠定了基础.

关键词：猪链球菌2型、溶血素、重组溶血素、原核表达、溶血活性

所属期刊栏目：33

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东省优秀中青年科学家奖励基金BS2009NY026

在线出版日期：2013-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：861-866