牛支原体膜蛋白6种提取方法的比较研究

摘要：

为筛选最佳牛支原体(mycoplasma bovis,Mb)膜蛋白的提取工艺,本试验以牛支原体W70株为代表,分别比较了4种浓度的TritonX-100 、TritonX-114、TritonX-100和TritonX-114;3种浓度碘化钾(KI)复合提取;反复冻融和超声裂解等6种Mb膜蛋白提取工艺和参数.各方法所获膜蛋白经SDS-PAGE和Bradford定量分析表明:不同方法的提取物中蛋白多肽和蛋白浓度各异;其中以3％ TritonX-114和0.4％TritonX-100结合0.6 MKI两法提取的蛋白条带清晰度较好,蛋白浓度及蛋白收集率较高,蛋白多肽条数24～28条,蛋白相对分子质量分别在170 000～12 200和167 000～11 400之间;超声裂解及反复冻融法提取效果一般;而1.8 MKI法效果最差.研究发现3％TritonX-114或0.4 ％TritonX-100结合0.6 MKI是Mb膜蛋白较优的提取方法.

关键词：牛支原体、膜蛋白、提取工艺、SDS-PAGE

所属期刊栏目：33

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：重庆市科委重大攻关资助项目CSTC,2010AA1021

在线出版日期：2013-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：855-860