奶牛S100A12基因克隆、原核表达及体外抗菌活性分析
克隆奶牛S100A12基因并在大肠杆菌中高效表达.采用RT-PCR扩增奶牛外周血白细胞中S100A12基因,构建原核表达载体pCold TF-S100A12,在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达并纯化.SDS-PAGE和Westernblotting分析显示S100A12基因以融合蛋白形式表达,表达量占菌体总蛋白的46.7%,纯化的重组蛋白(80 mg/L).琼脂扩散法测定重组蛋白对乳腺炎主要致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性.结果显示:重组蛋白对大肠杆菌有抗菌活性,而对金黄色葡萄球菌无抗菌活性.本研究为S100A12蛋白抗体制备及基因功能研究奠定了基础.
奶牛、乳房炎、S100A12基因、原核表达、抗菌活性
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S823(家畜)
中国博士后科学基金资助项目20090451250;四川省教育厅青年基金项目09zb054
2013-08-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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