猪孤雌胚胎干细胞建系的研究
以猪孤雌激活囊胚为材料，囊胚透明带消化后采用全胚培养，培养液中添加不同培养成分或因子（如FGF2，LIF，2i等），以及选择不同的初始培养液体积来筛选猪胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES细胞）建系的优化培养体系。囊胚内细胞团形成的细胞集落采用胰酶消化传代。结果显示：透明带消化后，囊胚贴壁率显著升高（19．4％VS．8．8％）（P〈0．05）；初始培养液体积比平常培养液体积（0．30mL／孔，24孔培养板）减半条件下，能显著提高其贴壁率（91．7％VS 20．0％）（P〈0．01），而且获得了可传至7代的类ES细胞系2株，碱性磷酸酶染色成阳性；当用2i因子（CHIR99021和PD03025901）去替代培养液中的FGF2，囊胚贴壁率（29．400VS53．3％）和原代集落形成率（20．0％VS 87．5％）反而显著下降（P〈0．01）。这表明培养液添加了FGF2和LIF（不舍2i因子），用24孔板培养，最初培养体积为0．15mL，透明带消化的培养体系比较适合猪孤雌激活胚的ES细胞建系。
猪、孤雌激活、胚胎干细胞、细胞培养、碱性磷酸酶
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S828(家畜)
国家重点基础研究发展计划973计划2010CB945404;中国博士后科学基金20090450039
2012-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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