安氏隐孢子虫肌动蛋白部分编码基因的表达及免疫保护性

摘要：

以筛选安氏隐孢子虫T7噬菌体展示文库获得的肌动蛋白（CA42）部分编码基因的序列设计特异性引物，扩增目的基因CA42，构建重组表达载体pET-28a-CA42，通过大肠杆菌BL21的诱导表达，产物经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定。然后纯化重组蛋白，免疫BALB／c进行体液和细胞免疫水平的检测，并观察重组蛋白对微小隐孢子虫的交叉保护性效果。结果显示，成功构建重组原核表达质粒pET-28a-CA42，Western-blotting显示重组蛋白约为19ku，能被安氏隐孢子虫免疫小鼠的多克隆抗体识别。重组蛋白免疫BALB／c小鼠的抗体水平差异显著（P〈0．05），CD4^＋T淋巴细胞数差异均显著，CD4^4／CD8^＋T淋巴细胞数的值与佐剂对照组和空白对照组相比差异均显著（P〈0．05）。各组小鼠经接种微小隐孢子虫卵囊后，试验组与各对照组相比卵囊减少率为32．2％，差异均显著（P〈0．05）。结果表明，成功表达了重组安氏隐孢子虫肌动蛋白，纯化的重组蛋白具有一定的免疫原性和交叉保护性。

关键词：安氏隐孢子虫、肌动蛋白、原核表达、免疫原性、交叉保护性

所属期刊栏目：32

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划资助项目2007BAD40805;“863”计划资助项目2006AAl0A207

在线出版日期：2012-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：871-874,893