日本乙型脑炎病毒E抗原表位的筛选与鉴定

摘要：

筛选日本乙型脑炎病毒（JEV）的E抗原表位，为开展用JEV模拟表位探索JEV的防治研究创造了条件，为多肽疫苗研制、药物筛选以及特异血清学诊断方法的建立提供重要的线索和依据。以抗JEvE蛋白的单克隆抗体作为固相筛选分子，应用噬菌体表面展示技术，按消减、结合、洗脱、扩增的顺序筛选噬菌体7肽库，挑取噬菌体单克隆培养并ELISA鉴定，对阳性克隆测序分析，确定JEVE抗原模拟表位的氨基酸序列。设计合成包含该表位的E抗原15肽（GGADSMSMAGMAVSY）cDNA序列，与pGEX-KG构建重组表达载体，诱导表达重组多肽并west-ernblot验证。经过4轮筛选后，噬菌体得到高度富集，挑取单克隆ELISA鉴定，有22个克隆呈阳性。对重组多肽进行Western blot验证，结果表明该重组多肽能够特异结合兔抗JEV多抗。应用上述方法成功筛选出JEV结构蛋白E的特异性噬菌体模拟表位，为下一步研究奠定了基础。

关键词：噬菌体表面展示技术、JEV、E蛋白、表位肽

所属期刊栏目：32

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划资助项目SQ2009AAl024483730

在线出版日期：2012-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：866-870