稳定表达RKIP对新城疫病毒复制的影响

摘要：

为了研究Raf激酶抑制蛋白（RKIP）对新城疫病毒（NDV）复制的影响，从鸡胚成纤维细胞中提取总RNA，采用RT-PCR方法扩增RKIP基因，将其克隆入真核表达载体pEGFP-N1中，经PCR、双酶切和测序鉴定，采用Fu-GENEHD法将阳性质粒转染Vero细胞，经G418筛选，有限稀释法获取单克隆细胞株，Western-blotting检测RKIP的表达。利用Real-time PCR测定病毒感染细胞后培养上清的病毒量。结果表明：成功构建鸡RKIP真核表达质粒；转染Vero细胞后经克隆化培养获得稳定表达鸡RKIP的细胞株Vero-RKIP；感染初期，NDV在Vero-RKIP上表现出了更强的复制能力。

关键词：Raf激酶抑制蛋白(RKIP)、真核质粒pEGFP-N1-RKIP、稳定表达、新城疫病毒

所属期刊栏目：32

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30972192;高校博士点基金资助项目201l0061110005

在线出版日期：2012-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：810-813,822