猪附红细胞体ORF2的全基因合成、表达与鉴定
通过重叠区扩增法(PCR-based accurate synthesis,PAS)人工合成猪附红细胞体ORF2基因,并使其在大肠杆菌(DE3)中高效表达。根据GenBank注册的AJ504999的ORF2基因序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成11对寡核苷酸片段,用PAS方法,人工合成ORF2基因。基因克隆入pMD18-T载体,经测序证实正确后,连接到表达载体PET-28a,获得重组表达质粒PET-28a/ORF2,导入大肠杆菌BL21(DE3),在37℃,IPTG终浓度1mmol/L的条件下诱导表达,经SDS-PAGE分析,Western-blot鉴定,在35 000附近出现目的片段。同时通过生物信息学软件对其蛋白二级结构及抗原表位等方面进行预测。
猪附红细胞体、ORF2、全基因合成、表达
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S858.28(动物医学(兽医学))
山东省中青年科学家奖励基金资助项目BS2009NY007;中国博士后基金特别资助项目200801417;山东省博士后创新项目专项基金资助项目200801001
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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