奶山羊BLG基因敲除载体的构建
根据已知的BLG序列设计引物,通过PCR技术克隆同源臂序列,5'端同源臂2 264 bp,包括外显子1,3'端同源臂4 461 bp,包括全部的外显子3、4、5、6、7,分别连入克隆载体pMD18-T Simple载体中并测序.然后以含有正负筛选标记基因的ploxpⅡ载体为基础,将5'端和3'端同源臂片段先后连入其中,进行酶切、PCR鉴定.将构建好的基因敲除载体转化组成型表达Cre重组酶的大肠杆菌BM25.8,验证Loxp位点的活性.结果表明,构建了奶山羊BLG基因第2外显子缺失的基因敲除载体pBLG2T,且pBLG2T载体中的正选neo基因可以被Cre重组酶去除.为获得BLG 1条等位基因缺失型细胞株以及培育高产优质奶山羊新品种奠定基础.
奶山羊、BLG基因、基因敲除、打靶载体
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S852.21(动物医学（兽医学）)
转基因生物新品种培育重大专项2008ZX08008-004
2011-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
858-863
