水泡性口炎病毒糖蛋白主要抗原决定区片段基因的原核表达和纯化
参照GenBank中水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)G蛋白基因的核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增约为810bp的G基因片段,并将其克隆到pGEX-4T-1表达载体上,将经PCR、酶切鉴定以及测序分析正确的阳性重组质粒命名为PGEX-G810,之后将其转化至表达菌株E.coli BL21(DE3),经IPTG进行诱导表达;表达产物经SDS-PAGE、western blotting等方法进行检测.SDS-PAGE结果表明,重组蛋白主要以包涵体形式存在,相对分子质量约为60 000;包涵体经变性、复性、Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化后,分离得到复性的融合蛋白.纯化的融合蛋白能与VSV阳性血清发生特异性免疫反应,证明表达的目的蛋白具有良好的抗原性.
水泡性口炎病毒、G基因、原核表达
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S852.65(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金资助项目31072107;吉林省科技发展计划项目20100221
2011-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
497-500
