猪圆环病毒2型感染性DNA的构建及病毒拯救
用PCR法扩增猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)全长基因组.将全基因组插入到真核生物表达载体PcDNA3.1的多克隆位点中,获得单拷贝重组质粒P-PCV2和串连双拷贝重组质粒p-2PCV2,将所得质粒分别转染无PCV污染的PK-15细胞系,经7次连续传代后,间接免疫荧光试验显示在细胞中含有病毒抗原.提取mRNA后经RT-PCR检测都有PCV2特异性基因转录.免疫小鼠后,对免疫后不同天数小鼠的血清用ELISA检测,结果到免疫后35 d病毒几乎都能检测到表壳蛋白特异性抗体,小鼠致死后在其体内也能检测到病毒DNA.结果表明,所构建的2种重组质粒均可表达并在体外组装出有感染性PCV2病毒粒子.为进行PCV2分子特性、疫苗免疫及致病机理研究打下了基础.
猪圆环病毒2型、感染性克隆、病毒拯救
31
S852.65(动物医学(兽医学))
国家科技支撑计划2006BAD06A012;家畜疫病病原生物学国家重点实验室课题SKLVEB2008ZZKT041
2011-07-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
169-173,188