O型FMDV VP1基因与山羊IL-18基因在昆虫细胞中的共表达与活性检测

摘要：

以杆状病毒pFastBacTM Dual为载体,将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因和山羊白介素18(gIL-18)基因,分别插入到双表达载体的P10启动子和多角体蛋白启动子PH的下游,构建重组质粒pFastBacTM Dual-gIL18-VP1,然后转化DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-gIL18-VP1,并利用昆虫细胞进行转染.间接免疫荧光试验(IFA)检测表明gIL-18基因和VP1基因同时在同一细胞中独立表达.将共表达产物进行生物学活性分析表明,重组蛋白能够诱导山羊脾淋巴细胞生成IFN-γ抑制水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上生长.本试验用Bac-to-Bac系统成功构建了同时含有gIL-18基因和VP1基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中得到了高效表达,且具有良好的生物学活性,从而为下一步研究gIL-18在口蹄疫(FMD)中的免疫调节作用奠定了坚实的基础.

关键词：口蹄疫、VP1基因、山羊白细胞介素18基因、共表达、sf9细胞

所属期刊栏目：31

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东省科技攻关重大专项SDSP2005041005

在线出版日期：2011-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：151-155