单克隆抗体间接免疫荧光检测猪瘟病毒方法的建立

摘要：

以作者制备的抗猪瘟病毒单克隆抗体（anti-CSFV McAb）为一抗、荧光素标记羊抗小鼠IgG为二抗,通过反应条件的优化,建立检测猪瘟病毒抗原的间接免疫荧光（IFA）检测方法。确定IFA最佳工作条件：CSFV最佳接种浓度和培养条件为CSFV 10-3倍稀释后接种PK15细胞,37℃5%CO2恒温箱中培养36 h;McAb最适工作浓度为1∶1 000倍稀释;荧光素标记的羊抗小鼠IgG荧光抗体的最适工作浓度为1∶50倍稀释。特异性试验表明,用建立的IFA检测方法检测CSFV感染PK15细胞为阳性,而检测伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）、猪2型圆环病毒（PCV-2）感染PK15细胞均为阴性。结果表明,建立的检测细胞培养中CSFV抗原的IFA检测方法具有敏感特异、简便快速等优点,可用于CSFV感染的实验室诊断及CSFV在感染细胞中的定位和动态分布研究。

关键词：猪瘟病毒、单克隆抗体、间接免疫荧光

所属期刊栏目：30

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2011-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1566-1570