融合蛋白MBP-enterocin A的表达、纯化及抗菌活性检测

摘要：

以重组质粒pGAIF为模板,PCR扩增编码细菌素enterocin A的基因片段OAH,克隆到表达载体pMAL-p2x中正确构建重组表达质粒pMA.将pMA转化大肠杆菌DH5a,构建enterocin A融合表达系统.加入IPTG诱导目的基因的表达,然后通过亲和层析方法纯化表达产物,并采用琼脂打孔扩散试验或者琼脂点种试验检测抗菌活性.SDS-PAGE分析结果显示,大肠杆菌表达系统能够高效表达可溶性的融合蛋白MBP-enterocin A,其相对分子质量与推测值(约47 000)相符.抗菌活性结果表明,MBP-enterocin A具有抗李斯特菌活性,而对金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌O157 : H7均不表现活性;以无害李斯特氏菌LIN3为指示菌,MBP-enterocin A纯化样品的抗菌活性可表示为800 BU/mL.

关键词：enterocin A、融合表达、抗菌活性

所属期刊栏目：30

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"863"计划资助项目2006AA10A206

在线出版日期：2011-03-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1446-1449