安氏隐孢子虫COWP部分编码基因的表达及免疫原性

摘要：

依据NCBI中安氏隐孢子虫囊壁蛋白(COWP)编码基因设计特异性引物,提取安氏隐孢子虫长春株总RNA,RT-PCR扩增目的基因AF,构建重组原核表达载体pET28a-AF,通过大肠杆菌BL21诱导表达,产物经SDS-PAGE以及Western blotting鉴定.然后纯化重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠进行体液免疫和细胞免疫水平的检测.结果显示,重组原核表达质粒pET28a-AF构建成功,Western blotting显示重组蛋白约为18 000,可被安氏隐孢子虫免疫小鼠的多克隆抗体和HRP标记的抗组氨酸抗体识别.重组蛋白免疫BALB/c小鼠的抗体水平差异显著(P＜0.05),与对照组相比,CD4+的值差异极显著(P＜0.01),而CD8+的值差异显著(P＜0.05).结果表明,成功克隆并表达了重组安氏隐孢子虫囊壁蛋白,纯化的重组蛋白具有一定的免疫原性.

关键词：安氏隐孢子虫、COWP、克隆、原核表达、免疫原性

所属期刊栏目：30

分类号：S852.72(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划农业领域课题项目2007BAD40B05

在线出版日期：2011-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1326-1329