大肠杆菌多重耐药调控基因soxS的克隆及其原核表达
根据GenBank中大肠杆菌的soxS基因序列设计引物,以大肠杆菌ATCC25922的基因组为模板,PCR扩增出约324 bp的soxS基因片段,将所得片段与pMD18-T simple vector连接,转化至JM109大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒序列测序结果与GenBank中报道一致.从阳性克隆中提取质粒,经BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶解,回收324 bp的目的片段,定向克隆到pET-28a表达栽体中,提取质粒,再次转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,成功地筛选出阳性克隆.经IPTG诱导阳性菌,获得表达产物,通过SDS-PAGE检测出soxS基因的表达.
大肠杆菌、soxS基因、克隆、原核表达
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S852.6(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金30400326;吉林省科技厅项目20010538;20030425;20050124;吉林省教育厅项目2005042
2011-01-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1318-1320,1325