猪蓝耳病病毒抗体双抗原夹心ELISA方法的建立及初步应用

摘要：

根据PRRSV VR-2332株序列设计了1对扩增PRRSV N蛋白基因的特异性引物,从PRRSV北方株感染细胞中提取总RNA,通过RT-PCR获得长约372 bp的N蛋白编码基因片段.将其克隆到pGEX-6p-1质粒,构建了原核表达载体pPRRS-N.重组基因在大肠杆菌中表达出相对分子质量约为41 000的融合蛋白,目的蛋白表达量约占菌体蛋白的28.5%.利用此重组融合N蛋白建立了一种检测PRRSV特异性抗体的双抗原夹心ELISA,并通过与商品化试剂盒的应用比较对本方法进行了系统评价.分析了来自北京、山东、河南、河北4省区13个养猪场的260份血清,结果表明,本方法的敏感性和特异性分别为93.5%和86.7%,与IDEXX PRRSV抗体检测试剂盒检测结果的符合率达到91.5%.

关键词：PRRSV、N蛋白、双抗原夹心ELISA

所属期刊栏目：30

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：山西省科技攻关计划基金20080311036-2

在线出版日期：2011-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1273-1276