猪结合珠蛋白基因的克隆、原核表达及单克隆抗体制备

摘要：

本研究的目的在于利用重组猪结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)制备特异性单克隆抗体.以梅山猪肝脏总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增猪hp基因,将其克隆到原核表达栽体pGEX-KG和pET-32a上,转化至E.coli BL21中,IPTG诱导下高效表达重组GST-Hp和HIS-Hp蛋白.用纯化的重组GST-Hp免疫BALB/c小鼠,用纯化的HIS-Hp作为包被抗原进行间接ELISA检测,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选阳性细胞株,制备单克隆抗体.结果表明筛选到2株高效分泌抗猪Hp单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3B4和3C8.Western-blot和间接ELISA检测均表明制备的单克隆抗体具有良好的特异性.

关键词：猪、结合珠蛋白、基因克隆、原核表达、单克隆抗体

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分类号：S852.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：华中农业大学2010年新兴学科研究生教育发展项目资助2010HAV-41

在线出版日期：2010-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1245-1247