非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的建立
依据非洲猪瘟病毒(ASFV)的vp73基因保守序列,设计了特异性引物与TaqMan探针,扩增片段69 bp,建立了ASFV实时荧光PCR检测方法.与OIE推荐用于检测ASFV的实时荧光PCR和普通PCR方法进行比对,结果显示,本文建立的方法与OIE两种检测方法的特异性相当,灵敏度与OIE荧光PCR方法相当,但比普通PCR方法高出至少10倍.标准定量曲线显示,本文方法最低检测限可达10 copies/μL病毒DNA(相关系数为0.993046).重复性试验的批内CV值为0.61%~1.14%,批间CV值为1.37%~3.14%,表明本文方法的重复性和稳定性良好.可见,本文建立的基于vp73基因的ASFV实时荧光PCR检测方法具备快速、准确、灵敏的特点,将为检验检疫部门防御ASFV传入我国提供更多技术支持.
非洲猪瘟病毒、实时荧光PCR、检测
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S852.651(动物医学(兽医学))
国家质检总局科研项目2009IK003;国家863课题200710Z418
2010-12-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1173-1178