鸭瘟病毒UL51基因在感染宿主细胞中的定位和转录特征
对鸭瘟病毒(DPV)UL51基因在感染宿主细胞内的定位和转录时相进行分析,为进一步研究该基因的特性和功能提供有用的试验数据和材料.构建pET32a-UL51原核表达载体,将其转化至E.coli BL21(DE3)中进行IPTG诱导表述后,用Ni2+-NTA琼脂糖凝胶柱层析法纯化该表达产物.以纯化的重组蛋白为抗原免疫兔子,制备兔抗UL51多克隆抗血清,通过间接免疫荧光和RT-PCR法检测该基因在DPV感染的鸭胚成纤维细胞(DEF)内的定位和转录情况.间接免疫荧光结果显示,最早可在感染后8 h的胞浆中检测到特异性荧光点,24～36 h有大量绿色荧光团块聚集于近核区域,之后随着细胞病变的增强,胞浆中的绿色荧光开始减弱,且在感染晚期的胞核中也出现了少量弥散的绿色荧光.RT-PCR结果显示,DPV UL51基因从感染后4 h开始转录,其后转录量不断增大,从6～48 h一直保持在较高水平,之后又降低.DPV UL51蛋白主要定位于感染的宿主细胞的胞浆中特别是近核 区域,与其在α-疱疹病毒中的同源物的定位结果一致;并且与其他几种α-疱疹病毒的转录情况对比后,可认为该基因是一个晚期(γ类)基因.
鸭瘟病毒、UL51基因、原核表达、间接免疫荧光、RT-PCR
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S852.65(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金项目30771598;教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目PCSIRT08;水禽现代农业产生技术体系岗位科学家项目2008-2012;教育部"新世纪优秀人才支持计划"项目NCET-06-0818;教育部高等学校科技创新工程重大项目培育资金项目706050;四川省基础研究重大项目07JY029-016/07JY029-017;四川省重点建设学科项目SZD0418
2010-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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