猪囊尾蚴头节单链抗体-PE40重组载体的构建及表达

摘要：

从绿脓杆菌ATCC27853菌株中提取基因组,PCR扩增PE40基因,与pMD18-T栽体连接并转化感受态大肠杆菌JM109中,构建重组质粒pMD-PE40;经鉴定正确后将PE40基因插入抗猪囊尾蚴头节单链抗体基因重组质粒pMD-ScFv中,构建重组质粒pMD-ScFv-PE40,经酶切、电泳回收目的片段,并亚克隆到表达栽体pET-28a中,构建重组表达载体pET-ScFv-PE40;鉴定后转化E.coli BL21,IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western blotting验证.结果表明,试验成功构建了重组表达载体pET-ScFv-PE40,目的片段约为1800 bp;Western blotting证明重组蛋白具有一定的反应原性,为重组免疫毒素的制备及动物保护性试验奠定了基础.

关键词：猪囊尾蚴头节、单链抗体、绿脓杆菌外毒素PE40、原核表达

所属期刊栏目：30

分类号：S852.73;R535(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30571396

在线出版日期：2010-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1064-1066