重组猪β防御素2在毕赤酵母中的表达及其鉴定

摘要：

根据GenBank猪β防御素2(pBD-2)的氨基酸序列,参照酵母偏爱的密码子,设计无信号肽序列的pBD-2的基因编码序列,并由公司合成.将合成的基因通过SnaB Ⅰ和Not Ⅰ位点插入到酵母表达载体pPIC9K的α因子信号肽序列下游,构建成pBD-2基因的分泌表达载体pPIC9K/pBD-2.利用电穿孔法将经Sal Ⅰ线性化的pPIC9K/pBD-2质粒导入毕赤酵母GS115中,通过G418加压筛选得到His+Mut+表型的高拷贝转化子.经PCR检测证明pBD-2基因在毕赤酵母染色体上得到整合.阳性重组酵母经摇瓶发酵培养和甲醇诱导,用SDS-PAGE方法在发酵上清中检测到重组pBD-2的存在,说明构建重组酵母菌能够分泌性表达pBD-2.琼脂孔穴扩散法检测结果显示,pBD-2对金黄色葡萄球菌有较好的抑菌活性.

关键词：猪β防御素2、毕赤酵母、分泌表达、抗菌活性

所属期刊栏目：30

分类号：S855.12(动物医学（兽医学）)

资助基金：河北省科技支撵计划资助项目07220401D;河北农业大学校长基金XZJJ2005-06

在线出版日期：2010-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1028-1031