应用巢式PCR检测隐孢子虫

摘要：

应用巢式聚合酶链反应(Nested PCR)建立了一种检测隐孢子虫(Cryptosporidium)的方法.试验中隐孢子虫卵囊纯化采用庶糖密度梯度离心法,以液氮-热水浴反复冻融及酚-氯仿抽提冷乙醇沉淀法制备模板DNA,根据隐孢子虫18S rRNA序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法.该方法特异性强,可检出牛源微小隐孢子虫(C. parvum)、羊源微小隐孢子虫(C. parvum),牛源安氏隐孢子虫(C. andersoni)、鸡源贝氏婚孢子虫(C.baileyi)及猪源隐孢子虫(C.suis);敏感性高,该方法最低核酸DNA检测量达到10 fg.初步应用结果表明,所建立的Nested PCR方法适合于隐孢子虫病的诊断和分子流行病学调查.

关键词：隐孢子虫、Nested PCR、检测

所属期刊栏目：30

分类号：S852.72(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划资助项目2007BAD40B05

在线出版日期：2010-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：779-783