山羊子宫内膜上皮细胞转染pCI-neo-hTERT质粒后的永生化

摘要：

为获得大量的、具有高度同一性和表型功能正常的山羊子宫内膜上皮细胞(EEC),本试验将含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT导入原代山羊EEC中,筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定,利用免疫细胞化学方法检测hTERT导入后细胞端粒酶活性的表达情况,探讨转染后细胞的生长特性.结果显示,转染后获得的阳性克隆细胞及其传代细胞呈明显铺路石状,与原代细胞形态一致,具有接触抑制性;角蛋白检测阳性;细胞具有较高的端粒酶活性,目前已传至50代仍稳定增殖;100 nmol/L的雌二醇(E_2)可促进该细胞的增殖;50,100 nmol/L的孕酮(P_4)可明显抑制该细胞的增殖.这表明hTERT导入山羊EEC后,可使其重建端粒酶活性,从而获得大量的、具有高度同一性和表型正常的细胞.

关键词：山羊、子宫内膜上皮细胞、hTERT、端粒酶活性

所属期刊栏目：30

分类号：S814.8;Q78(普通畜牧学)

资助基金：高等学校博士学科点专项研究基金200807120022;西北农林科技大学青年骨干教师支持计划01140305

在线出版日期：2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：228-232