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奶牛乳腺炎源性大肠杆菌csgC基因的克隆及载体构建

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根据GenBank上发表的curli菌毛csgC基因序列设计了1对特异性引物.从患乳腺炎的奶牛乳汁中分离出致病性大肠杆菌,经生物学鉴定后,提取全基因组DNA为模板,PCR扩增出csgC基因,连入pMD18-T克隆载体,测序,结果表明,扩增片段含有333个核苷酸,编码111个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的大肠杆菌W3110的全基因组DNA中的csgC基因序列最相近,氨基酸序列同源性为99.7%.该基因与原核表达载体pET32a+相连,转入BL21(DE3)感受态细胞.挑选阳性菌落经PCR鉴定和酶切鉴定后表明成功构建原核表达载体pET32a+/csgC.

大肠杆菌、curli菌毛、csgC基因、表达

29

S852.61(动物医学(兽医学))

国家"863"计划资助项目;山东省农业科学院重大成果培育基金资助项目2006YCG012;山东省农业科学院高技术自主创新基金资助项目2006YCX027

2009-06-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共4页

441-444

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中国兽医学报

1005-4545

22-1234/R

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2009,29(4)

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